MỚI

Hướng dẫn thực hiện quy trình lọc rửa tinh trùng để bơm vào buồng tử cung

Ngày xuất bản: 03/06/2022

Hướng dẫn thực hiện quy trình lọc rửa tinh trùng để bơm vào buồng tử cung áp dụng cho bác sĩ, điều dưỡng hỗ trợ sinh sản tại các bệnh viện

Tác giả: Giám đốc trung tâm hỗ trợ sinh sản Người thẩm định: Nguyễn Đức Hinh Người phê duyệt: Phùng Nam Lâm Ngày phát hành: 29/05/2020

1. Đại cương

Lọc rửa tinh trùng là kỹ thuật nhằm mục đích loại bỏ các tinh trùng chết và tinh tương nhằm thu được mẫu nhiều tinh trùng khỏe mạnh để bơm vào buồng tử cung hoặc làm thụ tinh trong ống nghiệm.

2. Chỉ định lọc rửa tinh trùng

  • Vô sinh do yếu tố cổ tử cung: do chất nhầy cổ tử cung, do kháng thể kháng tinh trùng.
  • Vô sinh do rối loạn phóng noãn.
  • Vô sinh do tinh trùng ít, yếu, bất thường mức độ nhẹ.
  • Vô sinh do rối loạn xuất tinh, rối loạn cương dương.
  • Vô sinh không rõ nguyên nhân.

3. Chống chỉ định lọc rửa tinh trùng

Bệnh nhân có các bệnh lý lây truyền qua đường tình dục ở giai đoạn cấp; bệnh nhân tắc cả 2 vòi trứng.

Hướng dẫn thực hiện quy trình lọc rửa tinh trùng để bơm vào buồng tử cung

Hướng dẫn thực hiện quy trình lọc rửa tinh trùng để bơm vào buồng tử cung

4. Chuẩn bị

  • Chuẩn bị cho lấy mẫu tinh dịch:
    • Người chồng cần kiêng quan hệ vợ chồng trong thời gian từ 3 đến 5 ngày. Không uống bia, rượu, lao động nặng trước ngày lấy mẫu.
    • Chuẩn bị lọ đựng mẫu, ghi tên vợ, chồng, tuổi, mã số bệnh án lên nắp và thân lọ.
    • Lấy mẫu tinh dịch bằng phương pháp thủ dâm. Cần rửa tay và bộ phận sinh dục trước khi lấy mẫu. Trường hợp khó lấy mẫu có thể lấy bằng bao cao su chuyên dụng, người vợ trợ giúp.
  • Chuẩn bị trang thiết bị và vật tư tiêu hao:
    • Dụng cụ:
      • Ống nghiệm đáy nhọn Falcon 14ml.
      • Ống nghiệm đáy tròn Falcon 14ml.
      • Ống nghiệm đáy tròn Falcon 5ml.
      • Máy ly tâm.
      • Tủ thao tác sinh học.
      • Buồng đếm Makler.
      • Kính hiển vi quang học X10, X20.
      • Lọ đựng mẫu.
      • Pipet Paster tiệt trùng.
      • Đầu côn 10-100μl.
      • Pipet aid 10-100μl.
      • Lam thủy tinh.
      • Lamel.
      • Khay, cốc inox tiệt trùng
      • Tủ ấm 37 độ C.
      • Tủ cấy CO2, 37 độ C.
    • Môi trường:
      • SpermGrad (Vitrolife, Thụy Điển) hoặc môi trường tương đương: 90%, 45%, (pha 70% nếu cần): 1ml mỗi loại x V tinh dịch.
      • Sperm Rinse (hoặc G-Rinse) (Vitrolife, Thụy Điển): 4 ml.
      • IVF (hoặc G-IVF) (Vitrolife, Thụy Điển): 1,5 ml

5. Quy trình lọc rửa tinh trùng

  • Đựng các mẫu tinh dịch lấy được vào khay inox. Để mẫu tinh dịch ly giải hoàn toàn ở nhiệt độ phòng hoặc trong tủ ấm 30 phút, ghi lại thời gian ly giải hoàn toàn và thể tích tinh dịch.
  • Nhỏ 10 μl tinh dịch vào buồng đếm Marler, soi dưới kính hiển vi quang học độ phóng đại x10: đánh giá các chỉ số: đếm mật độ tinh trùng, tỷ lệ tinh trùng di động nhanh, chậm, di động tại chỗ, tinh trùng bất động, tỷ lệ tinh trùng dị dạng. Ghi lại vào hồ sơ.
  • Dựa vào kết quả đánh giá để quyết định kỹ thuật chuẩn bị tinh trùng.
  • Chuẩn bị các ống nghiệm ghi tên bệnh nhân. Chuẩn bị ống cân bằng chứa nước cất khi quay ly tâm nếu cần. Kiểm tra đối chiếu tên để tránh nhầm lẫn mỗi lần thay pipet và ống nghiệm.
  • Thực hiện lọc rửa tinh trùng bằng:
    • Phương pháp “thang nồng độ”:
      • Làm thang nồng độ 2 lớp: lấy ống nghiệm đáy nhọn Falcon 14ml, dùng pipet Pasteur tiệt trùng nhỏ 1ml SpermGrad (Vitrolife, Thụy Điển) 90% xuống đáy ống, nhỏ từ từ (càng chậm càng tốt) 1ml SpermGrad 45% lên trên sao cho giữa 2 lớp môi trường có lớp phân cắt rõ.
      • Nhỏ 1ml tinh dịch trên hai lớp môi trường, sau đó quay ly tâm 1500 vòng x 15 phút.
      • Hút bỏ phần phía trên, lấy cặn tinh trùng thu được rửa sạch môi trường thang nồng độ bằng 4ml môi trường đệm HEPES (Sperm Rinse, G-Rinse…) trong ống nghiệm đáy tròn Falcon 14ml, quay ly tâm 1500 vòng x 10 phút.
      • Hút bỏ phần nước nổi, thu lấy cặn.
      • Đánh giá chất lượng tinh trùng sau lọc rửa: Lấy 20μl cặn vừa thu được nhỏ vào lam kính, đậy lamel soi dưới KHV x20 để tính tỷ lệ tinh trùng sống: > 98% là đạt yêu cầu.
      • Trường hợp mẫu có tỷ lệ tinh trùng chết nhiều: thao tác như trên nhưng làm thang nồng độ 3 lớp: 90- 70- 45%, mỗi lớp 0,5ml.
      • Cặn thu được dùng để bơm tinh trùng vào buồng tử cung.
    • Phương pháp “bơi lên” (swim-up):
      • Lấy ống nghiệm đáy tròn 14mm đã đựng sẵn 1,5ml IVF. Dùng pipet Pasteur thả nhẹ nhàng 1ml tinh dịch xuống đáy ống nghiệm.
      • Đặt ống nghiệm nghiêng 45 độ trong tủ ấm khoảng 45-60 phút để cho tinh trùng khỏe bơi lên lớp môi trường phía trên.
      • Hút nhẹ nhàng 0.7 – 1ml lớp phía trên.
      • Pha loãng với 2ml môi trường (Sperm Rinse).
      • Quay ly tâm tốc độ và thời gian tùy thuộc mật độ tinh trùng.
      • Hút bỏ phần trên, giữ lại 0.3ml cặn để bơm vào buồng tử cung.

Hình B.1: Kỹ thuật lọc rửa tinh trùng.

A. Thang nồng độ 2 lớp trước quay ly tâm. B. Thang nồng độ sau quay ly tâm. C. Phương pháp “bơi lên”.

  • Đánh giá chất lượng tinh trùng sau lọc rửa, ghi hồ sơ, bàn giao mẫu.

Bản quyền và thương hiệu: Thông tin và hình ảnh trên website thuộc quyền sở hữu của VinmecDr. Việc sao chép, sử dụng phải được VinmecDr chấp thuận trước bằng văn bản. Miễn trừ trách nhiệm: Tất cả những tư liệu được cung cấp trên website này đều mang tính tham khảo. Do đó, nội dung và hình ảnh sẽ được thay đổi, cập nhật và cải tiến thường xuyên mà không phải thông báo trước. VinmecDr không bảo đảm về độ chính xác cũng như sự hoàn thiện về thông tin. Chúng tôi không chịu trách nhiệm pháp lý cho những thiệt hại xuất hiện trực tiếp hay gián tiếp từ việc sử dụng hoặc hành động dựa theo những thông tin trên hoặc một số thông tin xuất hiện trên website này. VinmecDr không chịu trách nhiệm pháp lý về những sai sót, lỗi chính tả… do nhập liệu cùng với những sự cố khách quan khác như: nhiễm virus, hành vi phá hoại, ác ý… xảy ra trên website này cũng như các website liên kết, nếu có. Đường link liên kết VinmecDr sẽ không chịu trách nhiệm hay có nghĩa vụ pháp lý dưới bất kỳ hình thức nào về nội dung của những website không thuộc VinmecDr được liên kết với website www.vinmecdr.com, bao gồm các sản phẩm, dịch vụ và những mặt hàng khác được giới thiệu thông qua những website đó.

facebook
1

Bài viết liên quan

Bình luận0

Đăng ký
Thông báo về
guest
0 Comments
Inline Feedbacks
Xem tất cả bình luận

Bài viết cùng chuyên gia