Hướng dẫn thực hiện quy trình khử calci
Hướng dẫn thực hiện quy trình khử calci áp dụng cho đơn nguyên Giải phẫu bệnh – Bệnh viện Vinmec Times City.
Cung cấp hướng dẫn thực hiện quy trình khử calci đối với các bệnh phẩm xương hoặc canxi hóa. Hiện quy trình này được áp dụng tại đơn nguyên Giải phẫu bệnh – Bệnh viện Vinmec Times City.
Nội dung bài viết
1. Trách nhiệm khi thực hiện quy trình khử calci
- Bác sĩ, kỹ thuật viên, điều dưỡng, nhân viên vận chuyển,… và những nhân viên có liên quan đến việc thực hiện quy định.
- Trưởng đơn nguyên/ Kỹ thuật viên trưởng Đơn nguyên Giải phẫu bệnh chịu trách nhiệm giám sát và kiểm tra chất lượng.
2. Viết tắt và định nghĩa
- Viết tắt
- Định nghĩa:
- Khử xương: Là quá trình loại bỏ muối canxi ra khỏi mẫu mô. Sự hiện diện của muối canxi làm cho bệnh phẩm cứng, khó cắt và hại dao. Do vậy, cần thiết phải loại bỏ muối canxi ra khỏi mô để cho mẫu mô mềm hơn và dễ dàng cắt mảnh.
3. Mục đích, nguyên lý, yêu cầu và yếu tố ảnh hưởng đến khử xương
3.1. Mục đích
- Loại bỏ muối canxi ra khỏi mô.
- Không làm tổn hại hình thái của mô.
- Không gây ảnh hưởng lớn đến việc nhuộm.
3.2. Nguyên lý
Dùng dung dịch acid để loại bỏ Calci chủ yếu dưới 2 dạng CaC204 và Ca3(PO4)2 có trong mô để cắt mảnh được.
3.3. Những yêu cầu để khử xương thành công
- Mảnh mô nhỏ: Các mảnh mô được cắt dày từ 2 – 6mm, do mảnh dày hơn thời gian khử xương sẽ kéo dài hơn.
- Cố định đủ: Việc cố định đầy đủ rất cần thiết cho việc khử xương thành công
- Độ đồng đều: kiểm tra đánh giá độ đồng đều của mẫu mô thường xuyên là yêu cầu bắt buộc để khử xương thành công.
- Rửa: Mẫu mô cố định sẽ được rửa trong suốt quá trình khử xương. Đủ thể tích dung dịch khử xương: dung dịch khử xương phải đủ số lượng.
- Phù hợp với thuốc khử xương thích hợp: Lựa chọn thuốc khử xương thích hợp đối với từng loại mẫu.

4. Quy trình thực hiện quy trình khử calci
4.1. Loại mẫu bệnh phẩm
- Các loại mô có hàm lượng muối canxi cao như:
- Xương.
- Răng.
- Mẫu mô bệnh lý: hạch lao, canxi hóa loạn dưỡng (dystrophic calcification), một số loại u như teratoma,…
4.2. An toàn
- Mang mặt nạ, găng tay nitril, kính bảo hộ, quần áo bảo hộ. Khi cưa xương phải dùng 2 mảnh gỗ vuông cạnh để giữ xương cho chắc.
- Không bao giờ được sử dụng máy cưa xương một mình.
- Dung dịch khử xương là dung dịch acid, cần thực hiện các biện pháp an toàn hóa chất theo quy định.
4.3. Trang thiết bị
- Cốc đựng thủy tinh.
- Máy khuấy.
4.4. Hóa chất – Dung dịch khử calci
- Dung dịch khử Calci I
- EDTA2Na 10g.
- Nước cất 2 lần 100ml.
- Ammoniac nước hoặc NaOH (nếu cần).
- Khi hòa EDTA vào nước sẽ hình thành một vẩn đục. Điều chỉnh cho pH của dung dịch từ 7,4 hoặc 7,5 bằng Ammoniac hoặc NaOH.
- Dung dịch khử Calci II:
- Dung dịch acid Chlohydric –acid Formic (Callis & Sterchi 1998).
- Acid chlohydric 8% 1 thể tích.
- Acid formic 8% 1 thể tích.
4.5. Các bước thực hiện
1 | Cố định |
| |
2 | Khử calci |
| |
3 | Kiểm tra sự khử calci |
|
5. Kiểm soát chất lượng
5.1. Những yếu tố ảnh hưởng đến tốc độ của quá trình khử xương
- Nồng độ thuốc thử: Tăng nồng độ thuốc khử xương sẽ làm tăng tốc độ khử xương.
- Loại thuốc khử xương: Lựa chọn loại thuốc khử xương phù hợp mẫu mô.
- Nhiệt độ: tăng nhiệt độ cao hơn sẽ làm tăng nhanh tốc độ khử xương.
- Khuấy trộn dung dịch: khuấy nhẹ dung dịch khử xương sẽ làm tăng nhanh tốc độ khử xương.
- Mật độ xương: xương cứng thường khử xương lâu hơn.
- Độ dày mảnh cắt: mảnh cắt.

5.2. Các thuốc khử xương acid
Hóa chất | Nồng độ | Ưu điểm | Nhược điểm |
Aqueous nitric acid | 5% |
| Làm cho mô có màu vàng |
Nitric acid formaldehyde | 10% |
| Nhuộm nhân không tốt lắm |
Hydrochloric acid | 8% |
| Nhuộm nhân không tốt lắm |
Trichloroacetic acid | 5g trong 95ml formal saline |
|
|
Formic acid | 5% | Thường là dung dịch khử được lựa chọn thường quy tại nhiều PXN | Khử chậm, thường kéo dài nhiều ngày |
Dung dịch EDTA | 10% |
|
|
6. Lưu hồ sơ
Quy trình khử calci | QTQL.GPB.008 |
BM 01 – Biểu mẫu theo dõi khử Calci | Phụ lục 01 |
7. Các tài liệu liên quan
Đảm bảo chất lượng phòng xét nghiệm mô bệnh học – Phiếu kiểm soát chất lượng hóa chất pha
8. Danh sách phụ lục
Phụ lục 01: BM 01 – Biểu mẫu theo dõi khử Calci
9.Tài liệu tham khảo
- Trần Đức Hưởng, Giải phẫu bệnh vi thể lâm sàng, Xuất bản lần thứ I, Nhà xuất bản Y học, Hà Nội 2013 – Khử Calci trang 27 Quy chế bệnh viện – BYT/1997.
- Pranab Dey, “Basic and Advaced Laboratory Techniques in Histopathology and Cytology”, © Springer Nature Singapore Pte Ltd. 2018
- John D. Bancroft and Marilyn Gamble, THEORY AND PRACTICE OF HISTOLOGICAL TECHNIQUES, Fifth Edition-2002 Bone Gayle M. Callis, P.269
Bản quyền và thương hiệu: Thông tin và hình ảnh trên website thuộc quyền sở hữu của VinmecDr. Việc sao chép, sử dụng phải được VinmecDr chấp thuận trước bằng văn bản. Miễn trừ trách nhiệm: Tất cả những tư liệu được cung cấp trên website này đều mang tính tham khảo. Do đó, nội dung và hình ảnh sẽ được thay đổi, cập nhật và cải tiến thường xuyên mà không phải thông báo trước. VinmecDr không bảo đảm về độ chính xác cũng như sự hoàn thiện về thông tin. Chúng tôi không chịu trách nhiệm pháp lý cho những thiệt hại xuất hiện trực tiếp hay gián tiếp từ việc sử dụng hoặc hành động dựa theo những thông tin trên hoặc một số thông tin xuất hiện trên website này. VinmecDr không chịu trách nhiệm pháp lý về những sai sót, lỗi chính tả… do nhập liệu cùng với những sự cố khách quan khác như: nhiễm virus, hành vi phá hoại, ác ý… xảy ra trên website này cũng như các website liên kết, nếu có. Đường link liên kết VinmecDr sẽ không chịu trách nhiệm hay có nghĩa vụ pháp lý dưới bất kỳ hình thức nào về nội dung của những website không thuộc VinmecDr được liên kết với website www.vinmecdr.com, bao gồm các sản phẩm, dịch vụ và những mặt hàng khác được giới thiệu thông qua những website đó.